一、液氮儲(chǔ)罐充填液氮的注意事項(xiàng)

液氮罐恰當(dāng)操作方法：

一般而言，沖慎液氮時(shí)，揮發(fā)損害要?dú)v經(jīng)四十八鐘頭才可以定常情況，液氮罐定常情況所需時(shí)間能縮至十二鐘頭，揮發(fā)損害可降低50%。人們了解了液氮的特點(diǎn)和液氮儲(chǔ)罐的簡(jiǎn)略結(jié)構(gòu)，便以恰當(dāng)應(yīng)用它，也才可以充分運(yùn)用其特性?，F(xiàn)就應(yīng)用的關(guān)鍵點(diǎn)簡(jiǎn)述以下:

（一）、要有專職人員部門(mén)管理、應(yīng)用和維護(hù)保養(yǎng)。液氮罐貯存室要室內(nèi)通風(fēng)·如在密閉式的房間內(nèi)貯存多個(gè)液氮罐，則揮發(fā)了的N2將停留房間內(nèi)，進(jìn)而導(dǎo)致氧氣不足情況，就會(huì)有將會(huì)產(chǎn)生室息事故。實(shí)際操作液氮罐要輕拿小心輕放防止與其它物塊相碰撞，由于液氮罐經(jīng)排氣管而變成高寬比的真空泵情況，內(nèi)外槽遭受空氣的工作壓力是非常大的，以DR一10和DR一30特征分析，外槽受到的工作壓力，大概有4oKG至9oKG，盡管它做成能承受三倍于重量的抗壓強(qiáng)度，實(shí)際操作時(shí)還要十分注意，切勿掉下或撞擊。天馳液氮罐技術(shù)人員提示液氮罐要維持豎直，禁止亂倒罐里液氮以防產(chǎn)生事故。
（二）、一次充填液氮，或液氮罐內(nèi)部處在干躁情況時(shí)、先要開(kāi)展查驗(yàn)、看罐外界有沒(méi)有凹痕或產(chǎn)生其它異?，F(xiàn)象。罐里有沒(méi)有臟東西，基座是不是準(zhǔn)確固定不動(dòng)好。這種狀況都優(yōu)良，則可剛開(kāi)始充填液氮，并宜在自然通風(fēng)優(yōu)良的地址開(kāi)展，一般可在戶外開(kāi)展。如在房間內(nèi)完成時(shí)，須開(kāi)啟窗門(mén)以保持穩(wěn)定的自然通風(fēng)換氣情況。液氮的充填一種是充壓引入法，是以大的液氮器皿開(kāi)啟液閥接好柔性塑料軟管，立即對(duì)液氮罐充填液氮。另種是立即用型管澆筑法，這要需注意的是要使型管的頂端稍離去頸管，使液氮揮發(fā)的汽體能從型管與器皿的空隙逸出，不然會(huì)使液體從型管外溢，不但會(huì)提升_液氮損害，且會(huì)產(chǎn)生受凍事故。充填液氮的速率要遲緩，先引入少量，隨后稍停十多分鐘，使其制冷再慢慢注足至要求容積。

（三）、拿取貯精提斗時(shí)，先要將提斗稍為提升，使斗底離去基座，再將提斗平行面挪到罐的，隨遇而安往上提，姿勢(shì)要坦然訊捷，不能應(yīng)用力，以防扭彎或斷裂把手，拿取提斗時(shí)也要留意防止擦碰頸管內(nèi)腔，以防毀壞頸管，搖桿需放妥測(cè)量范圍圈里，蓋好蓋塞以防多跑氮。

（四）、液氮填補(bǔ)的周期時(shí)間。液氮降低到是多少的情況下才開(kāi)展填補(bǔ)呢?一般而言液氮?dú)埩袅肯喈?dāng)于全容積的含一告或就夠應(yīng)用一星期時(shí)，多方面填補(bǔ)為好。要知道填補(bǔ)容積，可將液氮罐放到秤上測(cè)重。一立升液氮重為0.8KG再加罐的凈重得到滿罐時(shí)的凈重，減掉目前稱重，便是應(yīng)填補(bǔ)的的容積。以便簡(jiǎn)單也能用一根細(xì)木棍，液氮內(nèi)數(shù)秒左右，將木棍快速取下在空氣中晃動(dòng)兩下，液氮的部分因溫度低而結(jié)為白霜，很易容術(shù)檢驗(yàn)罐里液氮的總量。

（五）、用車(chē)子運(yùn)輸和運(yùn)送時(shí)，液氮因?yàn)檐?chē)子的震動(dòng)而跟隨震蕩，進(jìn)而提升耗費(fèi)。提升使用量的比例，隨器皿樣子而有差別，如DR一10立升液氮罐，句天運(yùn)輸時(shí)間八小時(shí)，則使用量大概為100克(含0.12公升)另外因?yàn)槿∠绿崾值膶?shí)際操作也提升耗費(fèi)，如DR一10每一次實(shí)際操作大概將耗費(fèi)10克上下，以便使貯存物減少特異性和性運(yùn)送，液氮罐要做外衣或木箱包裝捆扎，中途非常堅(jiān)決杜絕液氮罐的倒翻，以防產(chǎn)生事故。

（六）、液氮罐內(nèi)部的清洗和干躁:液氮罐應(yīng)用全過(guò)程中，在內(nèi)部會(huì)存款水份。并沾有霉菌，也是將會(huì)掉進(jìn)提手，及其從提手排出的精夜?jié)B入于液氮里邊。液氮原是一種可塑性化學(xué)物質(zhì)，器皿內(nèi)部是不容易浸蝕的，因?yàn)樗鼍壒?，有時(shí)候?qū)?huì)出現(xiàn)相當(dāng)程度的浸蝕狀況，假如一旦混有霉菌，人工受精的受胎率也會(huì)因此減少。因而，每一年對(duì)液氮罐內(nèi)部要清理并干躁1一兩次，流程是:①?gòu)钠髅笕∠绿崾趾鸵旱?，置放二天上下。那樣器皿?nèi)部溫度即升高到?！嬷苓?。②用40℃一50℃的溫開(kāi)水或配上中性化去垢劑引入液氮罐內(nèi)，隨后拿布清洗。③自來(lái)水開(kāi)展清洗。④顛倒器皿使干躁。干躁法能夠選用吹風(fēng)干式或暖風(fēng)烘干法。如選用后面一種，溫度限定在40℃一50℃中間，應(yīng)防止60℃之上暖風(fēng)，以防危害液氮罐特性，減少使用年限。

（七）、液氮罐只有用以盛放液氮，不可以盛放其它冷凍劑。

液氮罐一般可分成液氮貯存罐、液氮運(yùn)輸罐二種。貯存罐關(guān)鍵用以房間內(nèi)液氮的靜放貯存，不適合在工作態(tài)度距離運(yùn)送應(yīng)用;液氮運(yùn)輸罐以便考慮運(yùn)送的標(biāo)準(zhǔn)，作了的抗震設(shè)計(jì)方案。其除可靜放貯存外，還可在充灌液氮情況下，作運(yùn)送應(yīng)用，但也應(yīng)防止強(qiáng)烈的撞擊和振動(dòng)。

二、液氮儲(chǔ)罐細(xì)胞冷凍

LN2儲(chǔ)罐細(xì)胞凍存是細(xì)胞生存的重要要領(lǐng)之一。使用凍存技能將細(xì)胞置于-196~C液氮中低溫生存，可以使細(xì)胞臨時(shí)離開(kāi)生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性生存起來(lái)，如許在必要的時(shí)間再蘇醒細(xì)胞用于實(shí)行。并且適度地生存肯定量的細(xì)胞，可以防備因正在造就的細(xì)胞被污染或其他不測(cè)變亂而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外，還可以使用細(xì)胞凍存的情勢(shì)來(lái)購(gòu)置、寄贈(zèng)、互換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時(shí)向造就基中參加掩護(hù)劑——終濃度5%~15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點(diǎn)低落，加之在遲鈍凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透出，淘汰了冰晶形成，從而制止細(xì)胞毀傷。尺度冷凍速率開(kāi)始為-1到-2℃/min，當(dāng)溫度低于-25℃時(shí)可加快，到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。

現(xiàn)在常用的掩護(hù)劑為(DMSO)，它們對(duì)細(xì)胞分子量小，溶解度大，易穿透細(xì)胞。

實(shí)行質(zhì)料

儀器：液氮儲(chǔ)罐、凍存管(塑料螺口專用凍存管或安瓿瓶)、離心管、吸管、離心機(jī)等

試劑：0.25%胰酶、造就基、含掩護(hù)劑的造就基(即凍存液)

附：凍存液配制：造就基參加甘油或，使其終濃度達(dá)5-20%。掩護(hù)劑的種類(lèi)和用量視差別細(xì)胞而差別。配好后4℃下生存。

在生產(chǎn)過(guò)程中，由于換熱器管板受水分沖刷、氣蝕和微量化學(xué)介質(zhì)的腐蝕，管板焊縫處經(jīng)常出現(xiàn)滲漏，導(dǎo)致水和化工材料出現(xiàn)混合，生產(chǎn)工藝溫度難以控制，致使生成其它產(chǎn)品，嚴(yán)重影響產(chǎn)品質(zhì)量，降低產(chǎn)品等級(jí)。冷凝器管板焊縫滲漏后，企業(yè)通常利用傳統(tǒng)補(bǔ)焊的方法進(jìn)行，管板內(nèi)部易產(chǎn)生內(nèi)應(yīng)力，致使其它換熱器出現(xiàn)滲漏，檢驗(yàn)設(shè)備情況，反復(fù)補(bǔ)焊、實(shí)驗(yàn)，2～4人需要幾天時(shí)間才能完成，使用幾個(gè)月后管板焊縫再次出現(xiàn)腐蝕，給企業(yè)帶來(lái)人力、物力、財(cái)力的浪費(fèi)，生產(chǎn)成本的增加。